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精子细胞BWW培养基储存液主要由氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、酚红等组成，不含葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素，是一种旨在用于广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液，一般加入葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素就成为精子细胞BWW培养基，又称活能培养液。其标准化成分配方依据Biggers-Whitten- Whittingham(BWW)研究小组在1971年发表的成果，适合于各种动物和人体精子细胞处理，该试剂经无菌处理。

正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。

• 无菌离心管
  
• 离心机
  
• 细胞培养箱

• 注意无菌操作，尽量避免污染。
  
• 如无Earle培养液和增补的Earle培养液，可用精子细胞BWW培养基代替。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 取干净的精液样本室温放置30～60min，使之充分液化。
  
• 制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：
  
  • 上泳法：取一个无菌的15mL锥底离心管，加入1mL液化的精液，在其上方轻轻加入Earle培养液1.2mL，45°倾斜试管，37℃孵育1h。轻轻竖立试管，取出最上层的1mL液体。加入8mL增补的Earle培养液稀释，500g离心5min，弃上清。加入Earle培养液0.5mL重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。
    
  • 非连续密度梯度法：取一个无菌的15mL锥底离心管，加入3mL 80%的Percoll。轻轻加入3mL 40%的Percoll于80%的Percoll液面上，小心操作，不要打乱两种液体的界面。轻轻加入1～2mL精液于梯度溶液上，500g离心20min，弃上清。将管底的精子团重新悬浮于5～10mL的Earle培养液中，500g离心5min，弃上清。加入1mlEarle培养液，重新悬浮。
• 将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO₂、95%空气的细胞培养箱中孵育1h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
  
• 500g离心精子悬液5min，使精子细胞密度接近于10×10⁶/ml，将精子重悬于0.5～1mL精子细胞BWW培养基（需要葡萄糖、丙酮酸钠、BSA等以及抗生素称为活能培养液）中，并在37℃含5% CO₂、95%空气的细胞培养箱内孵育18-24h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管20°倾斜。